近年來，長非編碼RNA（lncRNA）在各種癌症中起關鍵作用，包括非小細胞肺癌（NSCLC）。因此在腫瘤研究中，lncRNA也開啟了研究處於火熱模式。今天為大家介紹一篇lncRNA 在肺癌中的研究。

首先簡單介紹下全文的思路：在作者的研究中，主要專注於lncRNA LINC00968在NSCLC中的生物學功能和臨床意義。研究發現LINC00968在LUAD、LUSC組織中以及非小細胞肺癌中表達顯著增加。抑制LINC00968能夠在體外抑制NSCLC增長，遷移和侵襲。通過敲低LINC00968檢測凋亡相關蛋白BCL-2表達降低，BAX表達增加。同時作者觀察到Wnt信號通路參與LINC00968誘導的NSCLC進展。作者推測LINC00968可以作為非小細胞肺癌的新型的預後生物標誌物和治療靶點。

下面就來了解一下作者的研究內容吧。

一：利用資料庫篩選lncRNA

LINC00968在肺癌組織以及非小細胞肺癌細胞系中表達顯著增高。

首先作者通過oncomine資料庫分析發現，LINC00968在LUAD、LUSC組織中表達顯著上調。作者進而在非小細胞肺癌細胞系A549, H460, H1299, H1975， H358中驗證發現LINC00968表達顯著高於正常細胞系BES-2B。推測LINC00968可能參與非小細胞肺癌惡性化進程。

二：LINC00968的表型研究

1、敲減LINC00968抑制非小細胞肺癌增殖、遷移、侵襲能力

為了研究敲減LINC00968是否能夠影響非小細胞肺癌腫瘤發展進程，作者向A549、H1299細胞中轉染敲減質粒LV-shLINC00968以及對照質粒LV-NC進行有效的敲減LINC00968的表達。

通過cck8增殖實驗檢測發現，LV-shLINC00968可以顯著抑制細胞的存活。
細胞遷移侵襲實驗證明，抑制LINC00968可以顯著抑制細胞的遷移侵襲能力。

2、過表達LINC00968，可以促進非小細胞肺癌增殖、遷移、侵襲能力

作者向A549、H1299細胞中轉染過表達質粒LV-LINC00968以及對照質粒LV-NC進行有效的提高LINC00968的表達。cck8增殖實驗以及細胞遷移侵襲實驗證明過表達LINC00968，可以促進腫瘤進程。

3、敲減LINC00968可以引起A549細胞發生凋亡

為了驗證LINC00968是否參與調控腫瘤細胞的調亡，作者通過流式細胞術驗證敲減LINC00968可以引起A549細胞凋亡的發生。同時，敲減LINC00968可以下調凋亡抑制基因BCL2的表達，以及上調促凋亡基因BAX的表達。

三：LINC00968的機制研究

為了探究LINC00968調控非小細胞肺癌進程的機制，作者關注到Wnt/β-catenin信號通路。通過蛋白免疫印跡實驗發現，下調LINC00968的表達可以引起β-catenin以及 CyclinD1表達顯著下調，而GSK-3β的表達顯著上調。提示LINC00968可能參與調控Wnt/β-catenin 的活性。

在體外實驗後，作者又進行了體內實驗。通過構建裸鼠腫瘤模型，作者向裸鼠體內注射了A549的敲減LINC00968細胞株，腫瘤進程受到抑制，並且呈時間依賴關係。腫瘤組織中BCL-2的蛋白表達水平降低，BAX蛋白表達水平升高，與體外結果一致。

以上數據證實LINC00968在體內體外均可抑制NSCLC腫瘤進程。

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